Standartizuotas krūties biopsijos mėginių tvarkymas, fiksavimas ir transportavimas

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/breast-biopsija/about/pac-20384812

Aukšta{0}}kokybėkrūties biopsijapriklauso ne tik nuo radiologo tikslumo, bet ir nuo patologo standartizuoto mėginio tvarkymo. Kiekvienas žingsnis nuo audinių ištraukimo iki stiklelio paruošimo gali turėti įtakos galutinei diagnozei. Šiame straipsnyje aprašoma mėginio kelionė, išsamiai aprašoma, kaip užtikrinti, kad kiekvienas mėginys pateiktų tikslią diagnostinę informaciją.

1. Mėginių paėmimas ir pradinė apžiūra

Iššaudęs gydytojas atidaro adatos įpjovą, kad gautų brangų mėginį-mažą, paprastai pilkšvai-baltą arba gelsvą, siūlą-panašų audinio šerdį.

• Bendras egzaminas:Pirmiausia įvertinkite vientisumą. Idealios CNB šerdys yra cilindrinės, 1–1,5 cm ilgio, ~1–2 mm skersmens. Suskilę, smėlingi mėginiai gali rodyti prastą nukreipimą (pvz., kalcifikacijos centrą) arba technines problemas.
• Kiekio patikrinimas:Užrašykite gautų branduolių skaičių. Norint palaikyti įprastinę histologiją, imunohistochemiją ir galimus molekulinius tyrimus, reikia mažiausiai 3–4 branduolių.

2. Greitas ir tinkamas fiksavimas: svarbiausia

Fiksavimas yra pirmasis ir svarbiausias cheminis mėginio apdorojimo etapas. Jis greitai naikina ląsteles, koaguliuoja baltymus, apsaugo nuo autolizės / puvimo ir optimaliai išsaugo mikroarchitektūrą.

• Fiksacinis pasirinkimas:​ 10 % neutralaus buferinio formalino (NBF)yra absoliutus standartas. Puikus įsiskverbimas, vienoda fiksacija, geras branduolinis / citoplazminis dažymas.Niekadanaudokite alkoholį, glutaraldehidą ar kitus ne{0}standartinius tirpalus.
• Laikas:Mėginiai turi būti dedami į fiksatoriųnedelsiantištraukus. Uždelsta fiksacija sukelia DNR degradaciją, pablogindama IHC ir molekulinius rezultatus.
• Tūrio santykis:Fiksuojamasis tūris turi būti4-10 kartųmėginio tūris. Svarbus mažiems branduoliams. Nepakankamas fiksatorius išeikvoja buferinį pajėgumą, mažina pH, rūgština audinius ir naikina antigeniškumą.
• Trukmė:Ideali fiksacija:6-48 valandos. Pagal-fiksaciją (<6h) causes soft, difficult-to-section tissue. Over-fixation (>72h) rizikuoja „užmaskuoti antigenus“ ir pabloginti IHC dažymą.

3. Standartizuotas transporto protokolas

• Konteineris:​Nesandarios-sandarumo, saugiai uždarytos mėginių talpyklos.
• Ženklinimas:Etiketėse turi būti nurodytas paciento vardas, pavardė, ID, biopsijos vieta (kairė/dešinė krūtinė, kvadrantas), mėginio tipas (CNB/VAB), data ir užsakantis gydytojas. Dviprasmiškas ženklinimas yra pagrindinė mėginių maišymo{1}}priežastis.
• Paraiškos forma:Patologo pagrindinis klinikinės informacijos šaltinis. Būtina išsami informacija: klinikiniai radiniai, vaizdo aprašymas (BI-RADS kategorija), ankstesnė krūties istorija / operacija, hormonų terapija ir trumpa pastaba apie procedūrą.

Transportas:Pritvirtinkite konteinerius tam skirtuose laikikliuose, kad išvengtumėte išsiliejimo. Gabenimo metu venkite stipraus kratymo, kad išsaugotumėte trapių audinių struktūrą.

4. -Laboratorinis apdorojimas

• Kvitas ir patvirtinimas:​ Patologijos darbuotojai dar kartą{0}}patikrina pavyzdžio etiketę pagal išsamią paraiškos informaciją.
• Dehidratacija ir valymas:Automatiniai audinių procesoriai paleidžia mėginius per rūšiuotus alkoholius (dehidrataciją), ksileną (valymą) ir išlydytą parafino vašką (~12–16 valandų).
• Įterpimas:Įsiskverbtas audinys formuojamas išlydytame vaške, atšaldomas, kad susidarytų parafino blokas.Svarbus branduoliams:Nukreipkite audinio juostelęstatmenai​ prie bloko paviršiaus, kad maksimaliai padidintumėte{0}}skerspjūvio peržiūrą skaidrėse.
• Pjaustymas ir dažymas:Mikrotomas išpjauna 4–5 μm atkarpas nuo bloko, tvirtina jas ant stiklinių stiklelių, nudažo Hematoxylin & Eosin (H&E) ir dengiamųjų stiklelių. Patologai tiria šviesos mikroskopu.

5. Ypatingos aplinkybės

• Įtariama limfoma:Rezervuokite šviežią audinį arba naudokite specializuotus fiksatorius (pvz., RNRvėliau) srauto citometrijos/genetiniams tyrimams.
• ER/PR testavimas:Labai jautrus fiksavimo laikui / temperatūrai; griežtas protokolų laikymasis yra privalomas.
• HER2 testavimas:​Jei IHC yra 2+, būtinas FISH patvirtinimas; reikalauja aukščiausių fiksavimo kokybės standartų.

Išvada:Tiksli patologijos ataskaita prasideda nuo biopsijos, priklauso nuo fiksavimo ir baigiasi eksperto mikroskopija. Glaudus gydytojų ir patologų bendradarbiavimas kartu su griežtu visos pre-analitinės fazės standartizavimu sudaro tikslios krūties ligų diagnozės pagrindą.